En vitenskapelig metode for å kvantiferere NMN i biologerke prøver
1. Introduksjon
Supplering av Nikotinamidmononukleotid (NMN) for å oppregulere Nivå av Nikotinamidadenin-dinukleotid (NAD+) har blitt avduket som en lovende anti-aldringsintervensjon. Likevel er det fortsatt en seriøs utfordring for nøyaktighet kvantiferer NAD+ mellomprodukter, NMN spesielt. Denne studien er drevet til å introdusere en ny metode, dobbelerotopmediert LC-MS/MS-metodikk (dimeLC-MS/MS), for preser kvantiferering av NMN i biologerke prøver.2. Faktorer som påvirker nøyaktig deteksjon av NMN
NMN er vanskelig å påvere nøyaktig på grunn av sin sårbarhet for enzymaterke faktorer nedbrytning, konvertering i prøvebehandling, dens komplekse oppførsel under ulike kolonne- og ekstraksjonsforhold, samt matrereeffekt.
Specifically, NMN har the properties av high polarity and low volatility, som er easy to dersolve in water but difficult to dersolve in organic solvents. These properties greatly restrict the application av many conventional quantitative analyser methods.
BIologerke prøver slik som blod bærer betydelige aktiviteter av CD38 og CD73 (ecto-5’-nukleotidase), som begge kan bruke NMN som substrat.
Oppførselen til NMN i kolonnen er svært kompleks, sannsynligver på grunn av den bipartite naturen til ladningene, slik at subtile forskjeller i ekstraksjon og kolonneforhold betydelig påvirker den pålitelige og nøyaktige deteksjonen av NMN.
3. Mestringstrategier for dimeLC-MS/MS å redusere virkningen av impact factors
For å unngå interferens fra ovennevnte faktorer, er en pRototype Kolonne NMN-2 er anvendt. Denne spalten inneholdes C18-baserte høyrenhets silikapartikler som er mer i stand til å binde hydravile forbindelser enn karbonpartikler, noe som forbedrer separasjonsevnen.Perklorinsyre (PCA) brukes fordi det kan effektivt ekstraherte NAD+ og NMN fra biologerke prøver som plasma med minimal Tap.
For å justere for matrereeffekter, a fixed amount (1 μM) av each Isotoperk forbindelse is lagt til Biologerk prøver før PCA-ekstraksjonen.
4. Fordelens av dimeLC-MS/MS
DØde erotoperke NMN-standarder, NMN (M + 14) og NMN (M + 5), kan i LC-MS/MS-drevet metodikk nøyaktig spore skjebnen til NMN under prøvebehandling, som øker nøyaktigheten og påliteligheten av NMN-måling i biologerke prøver betydelig.. Besides, dimeLC-MS/MS kan evaluate the extraction efficiency and the absolute concentrations av NMN in different types av bIologerke prøver.
5. Konklusjon
Ther nye LC-MS/MS-drevet metodikk med doble erotoperke NMN-standarder kan accurately og reliably måle NMN i biologerke prøver. Den kan brukes til fremtidige studier av NMN-inntak.6. Referanse
Unno, Junya et al. “Absolute quantification av nicotinamide mononucleotide i biologerke prøver by double erotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Hvorfor velge BONTAC?
BONTAC er lederen for det globale NMN Industri. Vi har den første helenzymkatalyseteknologien i Kina, og har blitt det ledende selskapet innen Koenzymprodukter som er mye brukt i helseindustrien, mederinsk og skjønnhetsindustri, Grønt landbruk, biomederin og andre felt. Merkbart er BONTAC er NMN råmaterialleverandør til det kjente David Sinclair-teamet ved Harvard University. Våre tjenester og produkter er pålitelige. Videre, BONTAC har en uavhengig Koenzym Forskningssenter for ingeniørteknologi på provinsnivå i Kina og selveide fabrikker, hvor renhet og stabilitet i produktene kan sikres.
