Metodu xjentifiku għall-kwantifikazzjoni tan-NMN f'kampjuni bijoloġiċi
1. Introduzzjoni
Supplimentazzjoni ta'mononukleotide tan-nikotinammid (NMN)biex tirregola 'l fuq il-livell ta' nicotinamide adenine dinucleotide (NAD +) ġie żvelat li huwa intervent promettenti kontra t-tixjiħ. Madankollu, għadha sfida serja li jiġu kkwantifikati b'mod preċiż l-intermedji tan-NAD+,NMNb'mod partikolari. Dan l-istudju għandu l-qawwa li jintroduċi metodu ġdid, metodoloġija LC-MS/MS medjata b'isotopi doppji (dimeLC-MS/MS), għall-kwantifikazzjoni preċiża ta'NMNf'kampjuni bijoloġiċi.
2. Fatturi li jaffettwaw l-iskoperta preċiża ta 'NMN
NMN huwa diffiċli biex jiġi skopert b'mod preċiż minħabba l-vulnerabbiltà tiegħu għad-degradazzjoni enżimatika, il-konverżjoni fl-ipproċessar tal-kampjuni, l-imġieba kumplessa tiegħu f'kundizzjonijiet differenti tal-kolonna u l-estrazzjoni, kif ukoll l-effett tal-matriċi.
Speċifikament, NMN għandu l-proprjetajiet ta 'polarità għolja u volatilità baxxa, li hija faċli biex tinħall fl-ilma iżda diffiċli biex tinħall f'solventi organiċi. Dawn il-proprjetajiet jirrestrinġu ħafna l-applikazzjoni ta 'ħafna metodi ta' analiżi kwantitattiva konvenzjonali.
Bkampjuni joloġiċibħalid-demm iġorr attivitajiet sinifikanti ta' CD38 u CD73 (ecto-5’-nucleotidase), it-tnejn li huma jistgħu jużaw NMN bħala sottostrat.
L-imġieba ta 'NMN fil-kolonna hija kumplessa ħafna probabbilment minħabba n-natura bipartitika tal-ħlasijiet tagħha sabiex differenzi sottili fil-kundizzjonijiet ta' estrazzjoni u kolonna jaffettwaw b'mod sinifikanti l-iskoperta affidabbli u preċiża ta 'NMN.
3. Strateġiji ta' tlaħħaq ma'dimeLC-MS/MSbiex jitnaqqas l-impatt tal-fatturi tal-impatt
Biex tiġi evitata l-interferenza tal-fatturi msemmija hawn fuq, tiġi applikata kolonna prototip NMN-2. Din il-kolonna fiha partiċelli tas-silika ta' purità għolja bbażati fuq C18 li huma aktar kapaċi jorbtu komposti idrofiliċi minn partiċelli tal-karbonju, u b'hekk itejbu l-kapaċità tas-separazzjoni.
L-aċidu perkloriku (PCA) huwa użat peress li jista 'estratt b'mod effiċjenti NAD + u NMN minn kampjuni bijoloġiċi bħall-plażma b'telf minimu.
Biex jiġi aġġustat għall-effetti tal-matriċi, ammont fiss (1 μM) ta' kull kompost isotopiku jiżdied ma' kampjuni bijoloġiċi qabel l-estrazzjoni tal-PCA.
4. Il-vantaġġsta' dimeLC-MS/MS
L-istandards isotopiċi doppji tan-NMN, NMN (M + 14) u NMN (M + 5), fil-metodoloġija mmexxija mill-LC-MS / MS jistgħu jintraċċaw b'mod preċiż id-destin ta 'NMN waqt l-ipproċessar tal-kampjun, li jżid b'mod sinifikanti l-preċiżjoni u l-affidabbiltà tal-kejl NMN f'kampjuni bijoloġiċi. Barra minn hekk, dimeLC-MS/MS jista' jevalwa l-effiċjenza tal-estrazzjoni u l-konċentrazzjonijiet assoluti ta' NMN f'tipi differenti ta' kampjuni bijoloġiċi.
5. Konklużjoni
ThHuwaLC-MS/MS ġdid-Metodoloġija mmexxija bi standards NMN isotopiċi doppji tista 'tkejjel NMN b'mod preċiż u affidabbli f'kampjuni bijoloġiċi.Jista ' jintuża għal studji futuri dwar it- teħid ta ' NMN.
6. Referenza
Unno, Junya et al. "Kwantifikazzjoni assoluta tal-mononukleotide tan-nikotinamide f'kampjuni bijoloġiċi permezz ta' spettrometrija tal-massa tandem tal-kromatografija likwida medjata mill-isotopi doppji (dimeLC-MS/MS)." npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Għaliex tagħżelBONTAC?
BONTAChuwa l-mexxej tal-NMNIndustrija. Għandna l-ewwel teknoloġija ta 'kataliżi ta' enzimi kollha fiċ-Ċina, u saru l-intrapriża ewlenija fil-prodotti tal-koenzima li jintużaw ħafna fl-industrija tas-saħħa, medika u sbuħija, agrikoltura ħadra, bijomediċina u oqsma oħra. B'mod partikolari, BONTAC huwa NMNfornitur tal-materja prima tat-tim famuż David Sinclair fl-Università ta 'Harvard. Is-servizzi u l-prodotti tagħna huma affidabbli. BarraminnhekkBONTACgħandu ċentru indipendenti ta 'riċerka tat-teknoloġija tal-inġinerija tal-koenzimi fil-livell provinċjali fiċ-Ċina u fabbriki li huma proprjetà ta' lilhom infushom, fejn tista 'tiġi żgurata l-purità u l-istabbiltà tal-prodotti.
Ċaħda ta' responsabbiltà
ThHuwal-artiklu huwaibbażat fuq ir-referenza fil-ġurnal akkademiku. L-informazzjoni rilevanti hijaJipprovdugħal skopijiet ta' qsim u tagħlim biss, u ma jirrappreżenta l-ebda skop ta' parir mediku. Jekk ikun hemm xi ksur, jekk jogħġbokKuntattL-awturGħalDeletIon. Il-fehmiet espressi f'dan l-artikolu ma jirrappreżentawx il-pożizzjoni ta'BONTAC.